آنزیم HyperTherm SynFusion Reverse Transcriptase نسل جدیدی از آنزیم های رونوشت بردار معکوس (RT) است که توسط تیم تحقیق و توسعه شرکت راتین ژن مهندسی و تولید شده که با پایداری حرارتی بالا( تا 65 درجه) و غیرفعال کردن فعالیت RNase H امکان سنتز دقیق، کامل با بازده بالا از انواع RNA را فرام میکند
با افزودن دو قطعه پروتئینی 23 و 28 اسید آمینه ای به دو سر N terminal و C terminal و Piont Mutation، پایداری حرارتی و عملکرد بهینه آنزیم در بازه دمایی 45-65 درجه سانتی گراد شده که موجب باز شدن ساختار های ثانویه پیچیده در RNA و افزایش کارایی Priming می شود
با ایجاد جهش های نقطه ای در جایگاه فعال این دومن از آنزیم، فعالیت نوکلئازی آن کاهش یافته در نتیجه سنتز cDNA به صورت کامل و یکپارچه تا 13Kb انجام میشود
عملکر موثر حتی با مقادیر بسیار کم RNA (تا 1 پیکوگرم) با سنتز cDNA با طول کامل و صحت بالا
| Enzyme | Temperature (°C) | Ct |
|---|---|---|
| Invitrogen SuperScript IV Reverse Transcriptase | 45 | 24.37 |
| 48 | 24.21 | |
| 50 | 24.53 | |
| 53 | 24.73 | |
| 55 | 24.44 | |
| 60 | 25.12 | |
| 63 | 25.53 | |
| 65 | 26.18 | |
| HyperTherm SynFusion Reverse Transcriptase | 45 | 24.17 |
| 48 | 24.53 | |
| 50 | 24.37 | |
| 53 | 24.84 | |
| 55 | 24.01 | |
| 60 | 24.76 | |
| 63 | 25.64 | |
| 65 | 26.23 |
این آنزیم با اضافه کردن دو توالی به دو سر آنزیم و ایجاد point mutation در نواحی کلیدی، پایداری دمایی آنزیم را بالا برده درنتیجه بررسی بیان ژنهایی که به علت ساختار ثانویه rna در دسترس آنزیم قرار نمیگیرند و موجب عدم شرکت آنها در واکنش شده و درنتیجه موجب افزایش Ct در RT-qPCR می شود را امکان پذیر میسازد( در بسیاری از تست های بررسی بیان ژن، بالا بودن Ct به همین علت میباشد نه پایین بودن بیان ژن مربوطه در سلول هدف!!!)
با پایین آوردن فعالیت و یا غیر فعال کردن بخش RNase H رشته RNA بلند به صورت یکپارچه و کامل به cDNA تبدیل می شود در نتیجه درصورتی که پرایمر های PCR در اگزون های اولیه(نزدیک به سر 5′) طراحی شده باشند و از آنجایی که سنتز از انتهای 3′ (دم poly A) شروع شده و به سر 5′ میرسد، در نتیجه اگزون های اولیه نیز به طور کامل به cDNA رونویسی شده و در نهایت در واکنش PCR شرکت خواهند کرد( در موارد زیادی، بالا بودن Ct در ریل تایم PCR بررسی بیان ژن، عدم امکان طراحی پرایمر در اگزون های نزدیک به سر 3′ بوده در نتیجه به اجبار باید پرایمر را در اگزون های اول طراحی کنیم، حال اگر آنزیم RT به صورت یکپارچه سنتز رو انجام نداده باشه، اگزون های اول به cDNA تبدیل نشده در نتیجه در واکنش PCR شرکت نخواهند کرد در نهایت به اشتباه بیان ژن پایین گزارش میشود!!!)
با این محصول، دقت کارتون بالاس.
از آنجایی که این آنزیم توسط تیم تحقیق و توسعه داخل کشور تولید شده، ضمن دارا بودن کیفیت و کارایی بالا( همتراز با محصولات معتبر خارجی) قیمتی بسیار مقرون به صرفه دارد
جهت کسب اطلاعات بیشتر، خرید و پشتیبانی، با شماره های موجود در سایت ارتباط برقرار کنید.
فعالیت خود را از سال 1400 در زمینه تولید محصولات بیولوژی مولکولی و آزمایشگاهی، در پارک علم و فناوری سلامت کرمان، شروع کرده و محصولات متنوعی از کیت و تجهیزات آزمایشگاهی را با دریافت مجوز از سازمان صنعت معدن تجارت و غذاو دارو به تولید رسانده است.
کرمان، بلوار جمهوری، نبش کوچه 14، پارک سلامت کرمان

